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微生物選育技術(shù)在生物冶金中的應(yīng)用進(jìn)展
http://m.clprint.net.cn 時間:2009/1/5 16:01:21 來源:無 點(diǎn)擊次數(shù):1804

223基因工程育種

基因工程育種是指利用基因工程方法對生產(chǎn)菌株進(jìn)行改造而獲得高產(chǎn)工程菌,或是通過微生物間的轉(zhuǎn)基因而獲得新菌種的育種方法。來源不同的氧化亞鐵硫桿菌菌株對金屬硫化礦物的浸出效果是不一樣的,說明氧化亞鐵硫桿菌具有復(fù)雜的遺傳特性。賀治國等[11]通過4個引物RAPD分析獲得的平均相似性系數(shù)表明不同來源的氧化亞鐵硫桿菌菌株之間的相關(guān)系數(shù)在44%~83%之間。貝雷A D、漢斯福德G S對兩株氧化亞鐵硫桿菌的染色體基因組大小進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)其大小為29Mb左右[12]。據(jù)報道,在氧化亞鐵硫桿菌的glmS基因的 C-端發(fā)現(xiàn)了一個代號為Tn5468的轉(zhuǎn)座子,其序列與Tn7相似。在來源于不同地點(diǎn)的菌株染色體上存在兩種2030個拷貝的重復(fù)序列,ISTl IST2能在染色體DNA中移動,使菌落發(fā)生表型轉(zhuǎn)移[13]。1994Peng[14-15]利用大腸桿菌IncP族質(zhì)粒轉(zhuǎn)移到氧化亞鐵硫桿菌中并表達(dá)其功能的特性,使該質(zhì)粒上的兩個抗性基因(卡那霉素和鏈霉素基因)和抗砷基因(Asr)被成功地轉(zhuǎn)移到氧化亞鐵硫桿菌中。徐海巖等[16]利用氧化亞鐵硫桿菌抗砷工程菌Tf 59(pSDX3)處理含砷金精礦,獲得了較好的抗砷效果。趙清等[17]通過利用DNA體外重組技術(shù),構(gòu)建了含有強(qiáng)啟動子、可在tra基因誘動下轉(zhuǎn)移的組成型表達(dá)的抗砷質(zhì)粒pSDRA4。通過接合轉(zhuǎn)移的方式將其導(dǎo)入專性自養(yǎng)極端嗜酸性喜溫硫桿菌AcidithiobaciIIus C 11 Idw中,構(gòu)建了冶金工程菌Acidithiobac1lus caldus(pSDRA4),重組質(zhì)粒在喜溫硫桿菌中具有較好的穩(wěn)定性(重組質(zhì)粒保留76%以上),與野生菌相比,構(gòu)建的喜溫硫桿菌工程菌抗砷能力明顯提高,從10mmol/L提高到45mmol/L。

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